文献信息

南昌大学附属第二医院普通外科、南昌大学第二附属医院江西省分子医学重点实验室等团队的研究成果“The ubiquitin-like protein FAT10 in hepatocellular carcinoma cells limits the efficacy of anti-VEGF therapy by accelerating VEGF-independent angiogenesis”（肝癌细胞中的类泛素蛋白FAT10通过加速VEGF非依赖性血管生成来限制抗VEGF治疗的疗效）在学术期刊《Journal of Advanced Research》（IF：11.4）上发表。平生公司的离活一体CT（NEMO）在论文中提供了重要的小鼠肿瘤血管图像和定量分析结果。

该论文的通讯作者为邵江华教授。

文献摘要

引言：抗血管内皮生长因子（VEGF）治疗的疗效有限。然而，限制抗VEGF治疗疗效的关键因素及其潜在机制尚不清楚。

目的：探讨泛素样蛋白人类白细胞抗原F位点邻近转录物10（FAT10）在限制肝细胞癌（HCC）细胞抗VEGF治疗疗效方面的作用和机制。

方法：使用簇状规则间隔短回文重复序列（CRISPR）-CRISPR相关蛋白9技术在HCC细胞中敲除FAT10。贝伐单抗（BV）是一种抗VEGF单克隆抗体，用于评估体内抗VEGF治疗的疗效。通过RNA测序、谷胱甘肽S-转移酶下拉试验和体内泛素化试验评估FAT10作用机制。

结果：FAT10加速了HCC细胞中VEGF非依赖性血管生成，限制了BV的疗效，BV加重了缺氧，炎症促进了FAT10的表达。FAT10过表达增加了HCC细胞中参与多种信号通路的蛋白质水平，导致VEGF和多种非VEGF促血管生成因子上调。多种FAT10介导的非VEGF的上调信号补偿了BV对VEGF信号传导的抑制、增强VEGF非依赖性血管生成和促进HCC生长。

结论：作者的临床前研究发现，HCC细胞中的FAT10是限制抗VEGF治疗疗效的关键因素，并阐明了其潜在机制。这项研究为抗血管生成疗法的发展提供了新的机制见解。

实验方法

Balb/c裸鼠在吸入二氧化碳处死前10分钟接受50ml肝素腹腔注射。通过升主动脉注射造影剂。然后用微型CT扫描系统（NEMO micro-CT，平生医疗科技有限公司）对肿瘤进行成像。扫描电压60 kV，扫描电流为0.2 mA。通过一系列图像处理步骤提取血管和肿瘤。基于阈值选取，CT值大于1500HU的为血管（VV），CT值大于58UH为肿瘤整体（TV）。血管密度（VV/TV）由VV与TV的比值确定。

实验结果

微计算机断层扫描（micro-CT）的血管成像显示，在第四周，BV治疗的FAT10^+/+HCCLM3肿瘤模型中的肿瘤新生血管与未治疗组相比没有显著差异（图3B）。在第六周，通过显微CT观察到，与未经治疗的对照组相比，BV治疗的FAT10^+/+HCCLM3肿瘤模型中的肿瘤血管生成显著减少（图3D）。显微CT分析显示，第五周联合治疗后新生血管减少（图3J）。

实验方法

作者的临床前研究发现，HCC细胞中的FAT10是限制抗VEGF治疗疗效的关键因素，并阐明了其潜在机制。未来有必要进行深入的研究，以调查为什么炎症或缺氧诱导的bFGF、TGF-b、ANG2和PDGF的同时上调取决于FAT10，以及为什么炎症介导的VEGF上调是通过FAT10发生的，但缺氧介导的血管内皮生长因子上调与HCC细胞中的FAT10无关。此外，FAT10与肿瘤细胞（包括HCC细胞）中其他非VEGF促血管生成因子之间的关系需要进一步研究。这些研究有望为抗血管生成疗法的发展揭示新的靶点。

使用设备

                                  Micro CT (型号：NEMO) (平生医疗科技)

                                       影像软件：Avatar（平生医疗科技）