文献信息

华北理工大学临床医学院等团队的研究成果“Methylophiopogonanone a attenuates pulmonary fibrosis by inhibiting SPP1 - mediated macrophage polarization via the PI3K/Akt pathway”（甲基麦冬黄烷酮A 通过 PI3K/Akt 通路抑制 SPP1 介导的巨噬细胞极化，进而减轻肺纤维化）在学术期刊《Animal Models and Experimental Medicine》上发表。平生公司的离活一体CT（NEMO）在论文中提供了重要的小鼠肺图像和定量分析结果。

该论文的通讯作者为宋旭东教授、靳馥宇和毛娜讲师，第一作者为杨帆。

文献摘要

背景

特发性肺纤维化（IPF）是一种不可逆、致死性肺部疾病。甲基麦冬黄烷酮A（MOA）来源于中药麦冬，已被证实具有抗炎与抗氧化活性。但 MOA 对肺纤维化的作用尚不明确。本研究旨在探究 MOA 的抗纤维化药效。

方法

采用博来霉素（BLM）诱导的小鼠肺纤维化模型评价 MOA 抗纤维化作用，以吡非尼酮（PFD）作为阳性对照；检测指标包括组织病理学、显微计算机断层扫描（Micro-CT）、肺功能及血清生化。体外实验中，对 RAW 264.7 小鼠单核 / 巨噬细胞分别给予博来霉素（BLM）、脂多糖（LPS）、白介素 4（IL-4）、重组分泌型磷蛋白 1（SPP1）蛋白刺激，或构建Spp1过表达（OE spp1）模型；同时给予 MOA、吡非尼酮、Spp1短发夹 RNA（sh spp1）及 PI3K 抑制剂 LY294002 干预。通过转录组学、分子对接、微量热泳动（MST）、免疫组化、免疫荧光及蛋白印迹实验开展机制探究。

结果

MOA 可显著减轻博来霉素诱导的肺纤维化与胶原沉积，改善肺功能，且无肝肾毒性。转录组联合生物信息学分析筛选出 SPP1 为核心潜在靶点；分子对接与微量热泳动实验进一步证实 MOA 与 SPP1 具有良好结合亲和力。体内外实验均证实，MOA 可有效抑制 M1、M2 型巨噬细胞极化。机制层面：MOA 通过抑制 PI3K/Akt 信号通路，阻断 SPP1 介导的巨噬细胞极化，进而缓解博来霉素诱导的肺纤维化。

结论

本研究证实，甲基麦冬黄烷酮A（MOA）是极具潜力的天然活性化合物；其可通过靶向 SPP1 介导的PI3K/Akt 通路抑制巨噬细胞极化，发挥缓解肺纤维化的作用。

实验方法

动物模型建立

选用8 周龄雄性 C57BL/6J 小鼠，随机分为 5 组，每组 10 只。空白对照组：气管内滴注 0.9% 生理盐水；博来霉素（BLM）模型组：气管内滴注 1 mg/kg 博来霉素溶液；MOA 低、高剂量组：气管内滴注 1 mg/kg 博来霉素溶液，同时分别灌胃给予 2.5 mg/kg、10 mg/kg 甲基麦冬黄烷酮A；阳性药对照组（吡非尼酮组）：气管内滴注 1 mg/kg 博来霉素溶液，同时灌胃给予 100 mg/kg 吡非尼酮。

Micro-CT分析

遵照厂家说明书操作规程，采用NEMO‑II NMC‑200 型显微 CT 设备（平生医疗科技有限公司）对小鼠肺部进行高分辨率 CT 扫描。小鼠经异氟烷麻醉后，使用 AVATAR 1.5.0 软件（平生医疗科技有限公司）完成肺部三维影像重建。

实验结果

显微 CT 扫描结果显示：经 MOA 与吡非尼酮（PFD）干预后，可减少博来霉素（BLM）所致肺部高密度病灶的数量与面积（图 1D）。

图 1 甲基麦冬黄烷酮A（MOA）可减轻小鼠肺纤维化病变(D) 显微 CT 影像学检测：小鼠肺部矢状面、横断面、冠状面及三维重建影像（n=3）

实验结论

综上，本研究证实甲基麦冬黄烷酮A（MOA）是一种具有强效抗纤维化活性的新型天然化合物。MOA 可通过直接结合 SPP1 蛋白，并调控其介导的PI3K/Akt 信号通路抑制巨噬细胞极化，进而发挥缓解肺纤维化的作用。本研究不仅阐明了 MOA 全新的药效作用机制，同时也提示 SPP1 可作为肺纤维化疾病极具潜力的治疗靶点。

使用设备

                                  Micro CT (型号：NEMO) (平生医疗科技)

                                       影像软件：Avatar（平生医疗科技）